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实验39 主要蔬菜体内硝态氮含量的测定

生活常识佚名2023-06-01

1、实验目的

硝酸盐含量成为鉴定蔬菜及其加工品品质的重要指标。本实验目的是以农贸市场主要蔬菜为实验对象,掌握硝态氮含量测定原理及方法,为蔬菜食用安全提供依据。

2、实验方法原理

在强酸条件下NO3与水杨酸反应,生成硝基水杨酸。在碱性条件下(pH12)呈黄色,在一定范围内,其颜色的深浅与含量成正比,可直接用分光光度计测定。


(www.Ws46.com)

#水杨酸#

3、主要仪器设备

分光光度计;电子分析天平;10mL20mL刻度试管;移液管;25mL容量瓶;小漏斗(ф5cm);玻棒;洗耳球;电炉;铝锅;玻璃泡;13.7cm定量滤纸若干。

分光光度计

电子分析天平

10mL、20mL刻度试管

小漏斗

13.7cm定量滤纸

4、材料、试剂

实验材料为农贸市场主要蔬菜的叶片若干。

10μg·mL1 NO3-N标准母液配制:精确称取烘至恒重的KNO30.1444g,溶于蒸馏水中,定容至200mL(即为100μg·mL1 NO3-N溶液)。然后再吸取该溶液10mL,加蒸馏水稀释至100mL,即为10μg·mL1 NO3-N标准液。

5%水杨酸硫酸溶液配制:称取5g水杨酸先加少量浓硫酸(密度为1.84)溶解后,再加浓硫酸定容至100mL,摇匀,贮于棕色瓶中,置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化钠溶液配制:称取20g氢氧化钠溶于250mL蒸馏水中。

5、操作步骤

5.1. NO3-N标准曲线的制作

5.1.1 610mL刻度试管,编号,按下表配制每管含量为010μgNO3-N标准液。加入表中试剂后,摇匀。在室温下放置20min后,每管再加入8.6mL 8NaOH溶液,摇匀,使使显色液总体积为10mL。然后以0号管为空白对照,在410nm波长处测定吸光度(A)值。

39-1 NO3-N标准曲线配制的参考表

5.1.2 标准曲线绘制

15号管的NO3--N含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。

5.2. 样品中硝酸盐的测定

5.2.1样品液的制备

取一定量的植物叶片剪碎混匀,称取23g(三份),分别放入三支20mL刻度试管中,加入10mL蒸馏水,用玻璃泡封口,置于沸水浴中提取30min。到时间后取出,用自来水冷却,将提取液过滤到25mL容量瓶中,并用蒸馏水反复冲洗残渣,最后定容至刻度。

5.2.2样品液的测定

取三支10mL刻度试管,分别加入样品液0.1mL,蒸馏水0.9mL, 5%水杨酸-硫酸溶液0.4mL,混匀后置室温下20min,再慢慢加入8.6mL 8NaOH溶液,摇匀,使显色总体积为10mL,待冷却至室温后,以标准曲线0号管作空白对照 ,在410m波长处测定吸光度(A)值。

6、结果计算

根据样品液所测得的吸光度(A)值,从标准曲线上查出NO3--N的含量,按下式计算样品中NO3--N含量。

X × 样品提取液总量(mL

样品中NO3--N含量(μg·g1)=----------------------------------------------

样品鲜重(g×测定时样品液用量(mL

公式中:X-从标准曲线查得的NO3--N的含量(μg)。

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